层析柱与液相柱的区别
1、压力
液相色谱柱（尤其是分析性液相色谱）：压力较高，一般为10-20Mpa
层析柱：一般为常压，或使用真空泵（0.1Mpa左右）
2、填料
液相色谱柱：粒径较小（常规5-20um)
层析柱:粒径较大
3、分离度
由第二项决定，粒径越小，单位长度下理论塔板数越高
液相色谱柱：分离度比层析柱好
4、效率
液相色谱柱：分离速度快，一般在一小时内
层析柱:分离时间长，层析柱生产商，一小时以上
层析柱装柱步骤流程
1.计算每厘米柱床高度填料的数量；
2.选择合适的配件和末端筛网，选择不合适的滤网可能导致较高反压或填料泄露；
3.选择装柱流速
首先：拍排泡
第二：调水平
第三：匀浆
第四：装柱
第五： 绘制压力/流速曲线，装柱流速为大流速的70%-****。
柱效检测
柱效主要取决于装柱质量。
如果是离子交换或亲和层析填料，则不能使用有色物质，如蓝色葡聚糖。
表征柱效的两个指标是理论板当量高度（HETP）和对称因子As，使用NaCl或通过测定UV吸收或电导率进行计算。
使用NaCl溶液进行测定，优点样品是易得、安全，层析柱价格，缺点是可能与填料发生反应，特别是离子交换树脂，因此影响测定结果。
使用进行测定，其不与层析填料发生反应，并且可通过检测280 nm处的紫外吸收进行测定，并且，测定缓冲液的浓度可提高至10倍。
凝胶是一类多孔性高分子聚合物，每个颗粒犹如一个筛子。
当样品溶液通过凝胶柱时，相对分子质量较大的物质由于直径大于凝胶网孔而只能沿着凝胶颗粒间的空隙，随着溶剂流动，因此流程较短，层析柱厂家，向前移动速度快而首先流出层析柱；反之，相对分子质量较小的物质由于直径小于凝胶网孔，可自由地进出凝胶颗粒的网孔，在向下移动过程中，它们从凝胶内扩散到胶粒孔隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入与逸出，使流量增长，移动速率慢而后流出层析柱。
而中等大小的分子，它们也能在凝胶颗粒内外分布，层析柱，部分进入颗粒，从而在大分子物质与小分子物质之间被洗脱。
这样，经过层析柱，使混合物中的各物质按其分s子大小不同而被分离。
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